沙门氏菌的检验步骤是什么
现如今人们越来越重视食品安全,很多鸡鸭等家禽会感染沙门氏菌,导致禽流感,如果有人吃了感染了沙门氏菌的家禽,同样也会被感染,会出现发热,腹泻等症状,这是就需要及时就医,否则将会有生命危险。所以有人就会问那如何检测沙门氏菌,具体步骤是什么?下面就介绍一下沙门氏菌检测的步骤。
1、前增菌:在盛有90MLBPW的无菌均质杯中放入10g(mL)样品,用拍击式均质器拍打1min~2min,在36℃±1℃的温度中培养8h~18h。
2、增菌:将培养过的样品混合物轻轻摇动,移取1mL,种于10ML TTB内,在42℃士1℃的温度中培养18h~24h。同时,另取1mL,种于10mLSC内,在36℃±1℃的温度中培养18h~24h。
3、分离:分别在一个BS琼脂平板和一个H琼脂平板用接种环取增菌液1环。在36℃±1℃的温度中分别培养18h~24h(HE琼脂平板、沙门氏菌属显色培养基平板)或40h~48h(BS琼脂平板),在各个平板上观察生长的菌落。
4、生化试验:
三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验:分别在选择性琼脂平板上挑取2个以上典型或可疑菌落,接种三糖铁琼脂,先在斜面划线,再在底层穿刺;接种针不要灭菌,直接在试验培养基和营养琼脂平板接种赖氨酸脱羧酶,在36℃±1℃的温度中培养18h~24h,在必要的时候可延长至48h。
系列生化反应试验:在试验培养基接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶的同时,可直接接种蛋白胨水(供做靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基,也可在初步判断结果后,从营养琼脂平板上挑取可疑菌落接种。在36℃±1℃的温度中培养18h~24h,必要的时候可延长至48h,按表3判定结果。将已挑菌落的平板储存于2℃~5℃或室温至少保留24h,以备必要时复查。
5、血清学鉴定:在载玻片靠近磨砂的一边滴一定生理盐水作对照,在另外一边滴一滴血清,在三糖铁琼脂培养基的斜面用灭菌后的接种环取一点菌种,放进血清中,然后用酒精灯将接种环灭菌冷却后,在生理盐水中放入少量菌种。观察菌落是否在血清中凝结,同时与生理盐水中的菌落对比。
通过前增菌、增菌、分离、生化试验、血清学鉴定五个步骤来检测沙门氏菌,虽然方法比较简单,但是在实验的过程中一定要注意减少实验的误差,如果误差过大会造成实验失败,实验失败就应该重新开始实验。利用沙门氏菌的检测方法可以有效地避免生活中的食物感染沙门氏菌。